分子互作检测是生物学和生物化学研究中的一个重要领域,它涉及到识别和量化细胞内或体外不同分子(如蛋白质、核酸、小分子配体等)之间的相互作用。这些相互作用对于理解细胞信号传导、代谢途径、基因调控和疾病机制等基本生命过程至关重要。
蛋白-蛋白互作
免疫共沉淀(Co-IP):在生理条件下检测蛋白质之间的直接或间接互作。
GST Pull-down:体外检测蛋白质之间是否直接互作。
酵母双杂交(Y2H):在酵母细胞内检测蛋白质之间的互作,适合于低表达蛋白或瞬时表达蛋白。
荧光共振能量转移(FRET):在活细胞中实时监测蛋白质互作。
生物发光共振能量转移(BRET):类似于FRET,但在暗处工作,减少背景噪音。
表面等离子体共振(SPR):实时监测分子互作,无需标记。
蛋白质芯片(Protein microarrays):高通量检测蛋白质与多种配体的互作。
质谱联用(Mass Spectrometry):用于鉴定互作后的蛋白质复合体成员。