激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）

 

  激光共聚焦扫描显微镜以激光作为激发光源，采用光源针孔与检测孔共轭聚焦技术，每次只对空间上的一个点（焦点）进行成像，再通过计算机控制的一点一点的扫描形成标本的共焦图像。把X-Y平面（焦平面）扫描与Z轴（光轴）的扫描相结合，通过累加连续层次的二维图像，经过专门的计算机软件处理，可以获得样本的三维图像。在此过程中，来自焦点以外的光信号不会对图像形成干扰，从而大大提高了显微图像的清晰度和细节分辨能力。
    激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态，也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量, 配合焦点稳定系统可以实现长时间活细胞动态观察。

 

1、细胞/细菌/污泥类样本
   ①细胞： 冻存的细胞；25平方厘米培养瓶长到70%加满培养基室温固定好寄送
    ②细菌：菌液5000 rpm离心10 min，于1.5 mL离心管中得到绿豆大小沉淀，寄送沉淀。细菌类需要死活染色/ROS染色的，一般加冰袋泡沫盒4度保存，样品不和冰袋接触。
    ③蛋白/多糖类：样本加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存，样品不和冰袋接触。
    ④污泥类：样本如果太厚，可以进行冷冻切片，具体请和工作人员沟通。
2、植物类样本
    ① 直接拍摄：样品长宽不超过20mm，高不超过10mm；或直径不超过10mm，厚度不超过5mm，一定标出测试面。一般加冰袋泡沫盒4度保存，样品不和冰袋接触。
     ②制样后拍摄：可进行简单冰切及刀切，软化等。样本准备好后加冰袋泡沫盒4度保存，样品不和冰袋接触。
3、生物膜类样本
①金属/瓷砖/岩石等块体类：建议长宽高尺寸不超过1 cm，且均要求样品表面平整，需要标出拍摄面（测试面起伏<200um）；
②薄膜类：直径尺寸不超过2 cm，一般加冰袋泡沫盒4度保存，样品不和冰袋接触；
③若在爬片上培养生物膜，可将爬片粘于培养皿底部，充满培养基，将封口膜密封完全，再4℃保存。
4、提供清楚激发/发射波长，拍摄倍数等要求信息；若需要染色，需要注明染色剂种类，标明染料名称和拍摄条件（激发/发射波长）
   备注：若做细胞摄取实验或其他亚细胞器的定位实验时，要求样品自带荧光。
5、细胞类样品直接拍摄，需要封片后常温避光邮寄。
6、固体类直接拍摄样品建议长宽不超过20mm，厚度不超过10mm，重量不超过10g，一定标出测试面。
服务周期：
一般为样品接收后的1-2周，具体实验周期及送样时间请与前期对接工作人员沟通确认，谢谢！
交付内容：
2D模式每样拍摄3个视野，交付6张照片，3D模式每样拍摄1个视野，交付1张照片。结果反馈请在测试完成一周内，不建议回收样品，如有需要请提前反馈给工作人员。