Tunel染色 TUNEL凋亡染色作用原理为染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测。适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻切片）和细胞样本在单细胞水平上的凋亡原位检测、抗肿瘤药的药效评价。
细胞-Tunel染色送样要求：
客户可根据实验需要选择增值服务，如细胞培养、样品处理等。
Tunel染色+荧光拍照标本要求：
1. 对于贴壁细胞或细胞涂片，PBS洗涤3次，用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟，低温寄送（冰袋邮寄，防止结冰）；
2. 对于悬浮细胞或细胞悬液，收集细胞(不超过200万细胞)，PBS洗涤3次，用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟，为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。
荧光信号弱或没有荧光信号
原因1：样本处理不当
（1）样本切片太厚。建议适当将切片切薄一点，便于染色。
（2）脱蜡和水化不充分。建议脱蜡先60 ºC 20 min，再使用二甲苯两次5-10 min；而水化用梯度乙醇从高到低浓度浸洗。
（3）Proteinase K的孵育时间过短。优化Proteinase K的孵育时间，常用时间10-30 min。4 μm左右的片子孵育10 min，30μm左右的片子孵育30 min。
（4）Proteinase K浓度过低。建议蛋白酶K一般工作液浓度为20 μg/mL。
（5）放置在-20 ºC保存较长时间的切片不新鲜，减低染色效率。建议使用新鲜切片。
原因2：染色操作不当
（1）染色时间过短。建议一般 37 ºC 孵育60 min，可以根据凋亡损伤程度，可长至2 h，但要结合背景着色。
（2）TdT酶或荧光素/酶标记的dUTP浓度过低。建议适当提高TdT酶或荧光素/酶标记的dUTP浓度。
（3）TdT酶失活。建议TUNEL反应液临用前配制，短时间在冰上保存。不宜长期保存，长期保存会导致TdT酶失活。
（4）样本干燥。加上TUNEL反应液后，请盖上盖玻片/保鲜膜/湿盒中进行，保证样本均匀染色，又可防止反应液干燥。
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