显微成像平台

冷冻扫描电镜(Cryo-SEM)

仪器型号

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

预约次数:36058
服务周期:平均5.0个工作日
测试收费:沟通
详细介绍
 
项目介绍
 
   冷冻扫描电镜(Cryo-SEM)是一种先进的电子显微镜技术,专门设计用于观察那些在常温和常规脱水条件下易受损或变形的样品。该技术通过快速冷冻样品至极低温度(通常低于-150℃),使得样品内部水分迅速形成非结晶的玻璃态,从而有效保留其原始三维结构。样品经过超低温冷冻、断裂、镀膜制样(喷金/喷碳)等处理后,通过冷冻传输系统放入电镜内的冷台(温度可至-185℃)即可进行观察。 可实现直接观察液体、半液体及对电子束敏感的样品,如生物、高分子材料等。
    冷冻扫描电镜的工作流程大致如下:
1. 样品制备:首先,将样品快速冷冻,一般采用液氮或其他冷冻设备瞬间冷却至低温状态,以确保样品结构的瞬时固定。
2. 冷冻断裂(可选):某些情况下,可能需要在冷冻条件下对样品进行断裂,以便观察内部结构。
3. 升华去除水分:样品随后进入冷冻制样室,在高真空环境下进行升华处理,即让固态冰直接转化为气态,去除样品表面的冰层。
4. 镀膜处理:为了提高样品的电子散射能力并在观察过程中减少电子束造成的荷电效应,通常会对冷冻样品进行镀膜,如喷金或喷碳。
5. 低温传输与观察:最终,通过冷冻传输系统将样品保持在低温状态下转移到扫描电镜样品室内的冷台上(温度可维持在-140℃至更低),在这样的低温环境中进行观察和成像。 
 
样本要求
 
1.样本寄送要求:
冷冻扫描电子显微镜,意在保持样品鲜活程度,减少因常规前处理导致的皱缩形变,并允许含水量丰富的样品上机。寄送时应根据不同观测目的和样品分别选择相应寄送方法。
1)鲜活植物:建议有条件的可以连盆带土寄送。样品太大可以裁剪出观测目的附属周边的植物组织一同寄送(比如观测根就多裁一些,带上一些茎组织,尽量拖延失水时间)
2)含水量丰富样品,凝胶,乳液等 :分装到2ml离心管直接寄送
3)鲜活动物(例如蚂蚁,蚊子等):快速灭活后戊二醛固定寄送
4)大型动物组织(例如小鼠等实验动物):裁剪合适大小后用戊二醛固定好寄送
5)新鲜果实,肉类等:运输条件和机时允许下可以低温寄送。 如条件不满足则戊二醛固定后尽快送测。特别注意:如样品没有特殊温度需求,不建议干冰寄送
2.服务周期:
一般为样品接收后的1-2周左右,如遇法定假期需要顺延,具体实验周期及送样时间请与e测试工作人员沟通确认,谢谢!
3.交付内容:
每样提供8张拍摄图片(不提供分析服务),如需照片数量超过将产生额外费用; 结果反馈请在测试完成一周内,不建议回收样品,如有需要请提前反馈给e测试工作人员。
 
结果展示
 
微信截图_20240719155320微信截图_20240719155337
 
常见问题
 
 





question
1、冷冻扫描电镜样品的具体处理流程?
(1)将样品滴加到冷冻扫描专用样品托;
(2)快速投入液氮中冷冻:将装有样品的样品托投入液氮雪泥中速冻30s后,使用低温冷冻制备传输系统在真空状态下将其转移至样品制备腔室进行升华镀金处理。
(3)升华和镀金:样品在- 90℃升华10min之后以10 mA的电流溅射镀金30-60 s,送入扫描电镜样品室观察,冷台温度-140 ℃,加速电压 5 kv。
question
2、为什么相同的放大倍数会显示不同长度的标尺?
电镜设备是自动匹配标尺,不是人为控制的。比如同样是3万倍,有时候是3微米的标尺,有时候是4微米的标尺,无法人为控制,也不能另导出不带标尺的图片。
question
3、电镜图像的标尺与放大倍数的关系?
电镜图像的标尺通常都可以设定为固定的或可变的。前者是标尺的长度不变,但代表的长度随放大倍率变化;后者是标尺长度适应不同阶段放大倍率可变,但代表的长度在一定的放大倍率范围内固定不变。
因此同样的放大倍率可以有不同的标尺,但在同一输出媒介上的实际尺寸不变。改变输出方式时,放大倍率已改变(当然显示的放大倍率不会变化),测量的尺寸当然也就改变了。标尺数值的大小跟放大倍数没有必然关系,具体数值大小和不同的仪器厂商设置有关。如同样是3万倍,有时候是3微米的标尺,有时候是4微米的标尺,无法人为控制,也不能另导出不带标尺的图片。
拨打电话