细胞生物平台

NTA检测

仪器型号

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

预约次数:56352次
服务周期:平均5.0个工作日
测试收费:沟通
详细介绍
 
项目介绍
 
 利用NTA检测仪(Zetaview(Particle Metrix))快速、稳定地进行外泌体粒径、浓度鉴定。其方法原理即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),单一颗粒跟踪技术并结合经典微电泳技术(zeta电位)和布朗运动,利用Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。
 
样本要求
 
(1) 接收质量较好、纯度较高的外泌体、生物微粒、纳米粒、脂质体等多种样品,粒径分布在30-1000nm,原液浓度在10^6左右;样品粒径不能太分散。
(2)样品量至少准备35uL,干冰邮寄。
服务周期:
一般为样品接收后的1周,具体实验周期及送样时间请与e测试工作人员沟通确认,谢谢!
交付内容:
测试报告、微颗粒运动轨迹视频
 
结果展示
 
 
常见问题
 
 question
1、外泌体如何保存?
不同时间、温度的保存对不同的外泌体样本影响不一;如果研究方向为外泌体形态特征、蛋白或其他功能性分析,在分离后新鲜使用为最佳。目前主流的建议是提取出外泌体后最好是新鲜使用,或低温短期保存。
短时间几天内可以放4°C,长时间储存置于-80°C保存。
question
2、外泌体分离各种方法优缺点有哪些?
超速离心法(差速离心和密度梯度离心):操作繁琐,耗时长,分离外泌体纯度较高,但得率低,目前分离外泌体主流方法。
尺寸排阻色谱(Size-exclusion chromatography,SEC):应用填充多孔聚合物微球的柱子,精确分离大小分子,操作简便,耗时短,分离外泌体纯度较高。
聚合物沉淀法:操作简便,耗时短,可能会同时分离非囊泡污染物(包括脂蛋白),分离外泌体纯度较低。
磁珠免疫法:通过特定的抗体组合从样本中捕获不同类型的外泌体,免疫亲和技术具有高特异性、可获得高纯度的外泌体、且不影响外泌体形态完整等优点,是富集表征独特的外泌体的优选方法。但是此方法效率低,外泌体内含物的生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验的进行。
组合方法:如聚合物沉淀法+SEC (CellGS Exo-spin 外泌体纯化试剂盒)纯化流程温和,无需高速离心,操作简便并且产物纯度高,分离出的外泌体完好无缺,适用于下游功能研究、WB验证、RNA分析等。
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