显微成像平台

荧光显微镜

仪器型号

尼康倒置显微镜ECLIPSE Ti2-E,日本-尼康-倒置荧光显微镜尼康(TS2),德国-徕卡-Leica DM6B,全片荧光扫描仪-NIKON Eclipse 80i 荧光,荧光显微镜-Nikon

预约次数:60234
服务周期: 平均5-10个工作日
测试收费:沟通
详细介绍
 
项目介绍
 
 荧光显微镜(Fluorescence microscope) 是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成,利用一定波长的光源照射被检物体,使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。
 
样本要求
 
1、细胞/细菌/污泥类样本
    ①细胞: 冻存的细胞;25平方厘米培养瓶长到70%加满培养基室温固定好寄送;
    ②细菌:菌液5000 rpm离心10 min,于1.5 mL离心管中得到绿豆大小沉淀,寄送沉淀。细菌类需要死活染色/ROS染色的,一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触。
    ③蛋白/多糖类:样本加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存,样品不和冰袋接触。
    ④污泥类:样本如果太厚,可以进行冷冻切片,具体请和工作人员沟通。
2、植物类样本
     ① 直接拍摄:样品长宽不超过20mm,高不超过10mm;或直径不超过10mm,厚度不超过5mm,一定标出测试面。一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触。
     ②制样后拍摄:可进行简单冰切及刀切,软化等。样本准备好后加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触。
3、生物膜类样本
    ①金属/瓷砖/岩石等块体类:建议长宽高尺寸不超过1 cm,且均要求样品表面平整,需要标出拍摄面(测试面起伏<200um);
    ②薄膜类:直径尺寸不超过2 cm,一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触;
    ③若在爬片上培养生物膜,可将爬片粘于培养皿底部,充满培养基,封口膜密封完全,再4度保存。
4、提供清楚激发/发射波长,拍摄倍数等要求信息;若需要染色,需要注明染色剂种类,标明染料名称和拍摄条件(激发/发射波长)
   备注:若做细胞摄取实验或其他亚细胞器的定位实验时,要求样品自带荧光。
5、细胞类样品直接拍摄,需要封片后常温避光邮寄。
6、固体类直接拍摄样品建议长宽不超过20mm,厚度不超过10mm,重量不超过10g,一定标出测试面。
服务周期:
一般为样品接收后的1-2周,具体实验周期及送样时间请与e测试工作人员沟通确认,谢谢!
交付内容:
每样交付5张照片。结果反馈请在测试完成一周内,不建议回收样品,如有需要请提前反馈给e测试工作人员。
 
结果展示
 

          微信截图_20240709134120
 
常见问题
 
question
1、激光共聚焦拍照和普通荧光显微镜拍照有什么不同?
荧光显微镜使用的光源比激光共聚焦通能低,以短波长的紫外光为主,激光共聚焦光源主要是激光,分辨率高,可以逐点扫描,可以做三维重构,适合多重染色的样品观察。
question
2、荧光显微镜的工作原理?
荧光显微镜主要是通过激发光照射发光物质,然后观察发光物质吸收激发光能量后其内部原子从高能级跃迁到低能级时发射出的荧光。因此激发光的能量和发射光的能量是绝对重要的,直接影响观察结果。在荧光显微镜中主要是通过两组滤光片来实现对激发光能量和发射荧光能量的控制。常用的滤光片为:紫外激发光滤光片(300-450nm)、蓝色光激发光滤光片(470-495nm)、绿光激发光滤光片(538-560nm),红外激发光滤光片(608-648nm)。
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