1.简介:
慢病毒(Lentivirus) 是逆转录病毒的一种,慢病毒具有感染谱广泛特点,并且可以有效感染分裂和非分裂细胞。一经感染宿主细胞,慢病毒即利用反转录酶将其RNA转录成双链DNA,随后永久的整合到宿主细胞的染色体中,实现长时间稳定表达。此外,慢病毒免疫原性低,不易造成免疫反应,所以现在慢病毒系统除了被广泛应用到各种细胞系的基因敲除/敲入、基因过表达、RNA干扰、microRNA研究,还大量应用于活体动物实验中。
2. 实验流程:
客户提供详细的实验方案→提供目的基因信息(质粒测序图谱、名称、序列等)→所需要的病毒滴度及病毒液总量→是否需要纯化,若需检测外源基因的表达,请提供相应抗体。
1、慢病毒包装的应用有哪些呢?
慢病毒(Lentivirus)载体是目前细胞及模式生物实验中非常有效的工具,在基因转染方面有着许多独特的优势,对分裂细胞和非分裂细胞均能够有效感染,可容纳较大基因片段,同时能够将携带的基因稳定的整合到基因组中等优势,慢病毒包装逐渐成为科研必备的实验技能之一,多用于感染各种肿瘤细胞,建立稳定表达或沉默目的蛋白的细胞株。
2、慢病毒感染后多久检测细胞基因表达?
慢病毒感染后一般 72~96h 后检测基因表达,对于生长迟缓代谢慢的细胞,可以适当推迟检测时间,中途换液保持细胞的良好状态。
3、通常在转移载体中最大能够插入多大的目的基因序列?
基于 HIV 基因骨架的原因,通常插入的目的基因序列要小于4 kb,否则会影响病毒滴度甚至基因表达。