外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。外泌体主要使用超速离心法、过滤离心法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、几种方法进行提取。根据外泌体的大小和密度,用不同的离心速度,达到分离出外泌体的超速(差速)离心法,是学术上用的比较多且较认可的外泌体的提取方法,被认为是外泌体提取的黄金方法。
一般样品量:血清/血浆6ml、细胞上清40ml,干冰运输,注意:分离exosome前的样品不能加入任何RNA保护剂。
外泌体提取后,后续可进行电镜、NTA相关测试服务。若后续不需要做其他实验,提取的外泌体干冰运输回寄。
一般需要提供多少细胞培养液提取外泌体?
培样液提供量取决于细胞系。有些细胞系外泌体释放量高,几毫升即可;有些释放量低,需要上百毫升。一般来说一个普通的细胞系,用超离分离外泌体,第一次摸索条件,起始培液量最好50ml以上。