细胞迁移/侵袭实验流程

　　1、细胞划痕

　　实验流程如下：

　　(1)先用marker笔在6孔板背后，直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。

　　(2)在孔中加入计数好的细胞，具体数量因细胞不同而定(过夜能铺满即可)。

　　(3)第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。

　　(4)用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。

　　(5)放入37度5%二氧化碳培养箱，培养0，6，12，24小时后取样，拍照。

　　注意：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)。

　　2、Transwell法

　　实验流程如下：

　　(1) 换无血清或低血清培养基培养细胞，排除血清的影响。

　　(2)铺下室培养基：下室铺培养基(液体需刚刚好);

　　制备细胞悬液：使用胰酶消化细胞，制备细胞悬液;

　　铺上室细胞：将上层小室放入下层小室，将细胞铺在上层小室中。

　　(3)继续培养：细胞培养箱中培养 24-48 小时，具体时间根据不同细胞而定。

　　(4)染色：先使用固定液固定细胞(防止细胞形态发生改变)，然后使用结晶紫进行染色。

　　(5)拍摄及数据分析。