BLI生物膜干涉技术的简要工作流程

　　生物膜干涉(Bio-Layer Interferometry, BLI)是一种用于实时监测和量化生物分子间相互作用的技术。这项技术特别适用于检测蛋白、抗体、核酸、细胞受体以及其他生物大分子间的结合事件。BLI的基本原理是通过检测生物膜厚度的变化来间接测量分子结合的动力学参数，如结合常数(Ka或kon)和解离常数(Kd或koff)，从而计算出亲和力(KD)和浓度信息。

　　下面是BLI技术的简要工作流程：

　　生物传感器准备：一个光纤生物传感器被固定在一个装置上，其末端覆盖有一层薄薄的生物膜。这层生物膜通常是通过化学反应预先固定了某种目标生物分子(捕获分子)。

　　白光发射：仪器发射白光到生物传感器的表面，光线在生物膜和周围介质的界面上发生反射，形成干涉图案。

　　反射光谱记录：仪器收集反射回来的光谱，并记录不同波长的光强度。由于生物膜厚度的变化会影响光的干涉模式，因此反射光谱会随着分子结合事件的发生而改变。

　　分子结合：当一个未标记的分析物(如蛋白质、抗体或核酸)与传感器上的捕获分子结合时，生物膜的厚度会增加，引起反射光谱的位移。

　　实时监测：系统实时监测这些光谱位移，从而跟踪分子结合和解离的动态过程。

　　数据分析：通过软件分析反射光谱的位移，可以计算出结合和解离的速率常数，进而推算出亲和力(KD)等重要参数。

　　BLI技术的优势包括：

　　不需要对样品进行标记，减少了样品制备的复杂性;

　　实时监测，能够提供动力学和亲和力的详细信息;

　　需要的样品量很少，适合珍贵样品的检测;

　　操作简单，自动化程度高，可以进行高通量筛选。

　　BLI技术广泛应用于药物发现、抗体筛选、蛋白质组学、疾病标志物识别等领域。其中，Octet平台是基于BLI技术的代表性系统，在生物医学研究和制药行业中得到了广泛应用。