tunel染色是一种用于检测细胞凋亡的技术,全称为“脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法”(Terminal Deoxynucleotidyl
Transferase Mediated dUTP Nick End
Labeling)。这项技术基于细胞凋亡过程中DNA的断裂,产生大量的3'-OH末端。通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用,可以将荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素标记的脱氧核糖核苷酸标记到这些3'-OH末端上,从而实现对凋亡细胞的可视化检测。
TUNEL染色的基本原理
DNA断裂:在细胞凋亡过程中,染色体DNA会发生双链或单链断裂,产生3'-OH末端。
末端标记:TdT可以在这些3'-OH末端将荧光素标记的脱氧核糖核苷酸(通常是dUTP)添加上去。
检测:通过荧光显微镜或流式细胞术等技术检测标记的DNA片段,从而定位和量化凋亡细胞。