行业信息

去外泌体血清的制备步骤

更新时间:2024-08-26 点击次数:0 所属栏目:行业信息

  “去外泌体血清”指的是经过处理以去除外泌体(exosomes)成分的血清。外泌体是一类由细胞分泌的小囊泡,直径大约在30-150纳米之间,它们含有蛋白质、脂质、RNA(包括miRNA和mRNA)等生物分子,并参与细胞间的通讯。在外泌体研究和某些细胞培养应用中,去除血清中外泌体是很重要的一步,因为外泌体可能干扰实验结果或影响细胞的行为。

0f7c8b0adc6edd96bd5c2037e2d8c80e_400x400_auto.jpg

  去外泌体血清的制备通常包括以下几个步骤:

  离心处理:

  低速离心:首先进行低速离心(例如2000-3000 rpm)以去除血清中的大颗粒,如细胞碎片等。

  高速离心:随后进行高速离心(例如100,000 g以上),这一步是为了去除血清中外泌体。这个过程通常需要较长时间(如数小时或过夜),以确保尽可能多地去除外泌体。

  超滤:

  使用超滤膜进行过滤也是一个有效的方法。通过选择合适孔径大小的滤膜(如0.22 μm或更小),可以去除血清中外泌体。

  商品化试剂盒:

  市面上也有专门用于去除血清中外泌体的商品化试剂盒。这些试剂盒通常包含特定的试剂和步骤,可以简化去除过程,并且在一定程度上保证了去除效果的一致性和有效性。

  尺寸排阻层析(SEC):

  一些实验室也会使用尺寸排阻层析来去除外泌体,这种方法可以根据分子大小分离血清成分,从而去除外泌体。

  免疫沉淀:

  通过特异性抗体识别外泌体表面的标志物,如CD63、CD9等,然后进行免疫沉淀,也可以去除外泌体。

  在进行去外泌体血清的制备时,需要注意保持无菌条件,以防止污染。此外,去除外泌体的过程中可能会损失一些血清中的营养成分,因此在选择去除方法时需要权衡利弊。最后,去除外泌体的效果可以通过透射电子显微镜(TEM)、纳米颗粒追踪分析(NTA)等方法来验证。

NEWS

新闻动态
拨打电话