免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种在组织学和细胞学中广泛应用的技术,它利用抗原-抗体反应的特异性来检测和定位组织或细胞中的特定蛋白质。免疫组化技术不仅可以用于定性检测,还可以进行相对定量分析,是现代病理学、分子生物学和临床诊断中不可或缺的工具。
免疫组化的基本步骤通常包括:
样本制备:组织样本通常需要进行固定、包埋(如石蜡包埋)和切片处理,以便后续的操作。
脱蜡和水化:如果是石蜡包埋的样本,需要通过有机溶剂去除石蜡,并逐步用水化来恢复组织的亲水性。
抗原修复:为了提高抗体的识别效率,可能需要通过热诱导、酶消化等方式来修复或暴露抗原表位。
封闭非特异性结合位点:使用血清或蛋白质溶液封闭组织上的非特异性结合位点,以减少背景染色。
一抗孵育:将样本与特异性抗体(一抗)在适宜条件下孵育,使抗体与目标抗原结合。
清洗:去除未结合的抗体,准备下一步操作。
标记和显色:使用标记的二抗或标记的一抗,通过酶促反应、荧光标记等手段进行显色,以可视化抗原-抗体复合物。
复染:为了增加样本的对比度,可能会使用复染剂,如苏木精,对细胞核进行染色。
封片:使用封片剂将样本永久固定在载玻片上,以便长期保存和观察。
观察和分析:使用光学显微镜或荧光显微镜观察染色结果,进行图像记录和分析。
免疫组化在临床上的应用主要包括:
肿瘤的诊断与鉴别诊断
确定转移性肿瘤的原发部位
肿瘤的病理分型
软组织肿瘤的诊断和分类
微小转移灶的检测
评估肿瘤的预后和指导治疗方案的选择
在科研领域,免疫组化也是研究蛋白质表达、定位和功能的重要工具。
免疫组化染色的费用因地区、医院、检测项目数量以及是否采用自动化设备等因素而异。
如果涉及多个检测项目,总费用可能会显著增加,因为每个额外的抗体或标记都需要额外的费用。有些医院或实验室可能会提供套餐服务,针对特定类型的疾病(如癌症)进行一系列相关检测,这种情况下总费用可能高点。
如果您需要进行免疫组化染色,建议直接联系您所在地区的医疗机构或者检测机构比如e测试,获取价格信息详情。